Guia do microscópio estereoscópico: métodos de observação de luz transmitida

Os microscópios estereoscópicos são ferramentas úteis para examinar espécimes macroscópica e estereoscopicamente. Estes microscópios fornecem caminhos de observação individuais para cada olho, o que proporciona alguma profundidade ao espécime, de forma a parecer que você está observando a olho nu. Microscópios estereoscópicos oferecem dois tipos principais de iluminação: refletida e transmitida. A Iluminação refletida projeta a luz para baixo no espécime, permitindo-o observar o reflexo. Este tipo de iluminação funciona melhor com espécimes opacos, como rochas, minerais, plantas, insetos e cerâmica. A Iluminação transmitida projeta a luz para cima e através do espécime. Este tipo de iluminação funciona melhor com os espécimes translúcidos, como células, tecidos, embriões, peixes-zebra ou outras amostras aquáticas pequenas.

O tipo de espécime determina o tipo de iluminação que funcionará melhor. Em muitos casos, você poderá precisar usar vários métodos. Cada tipo de iluminação também possui diversos métodos de observação, tal como mostrado na Tabela 1 a seguir.

Tabela 1 — Métodos de observações comumente usados para microscópios estereoscópicos

Hoje, irei explicar a iluminação transmitida, para que você possa aprender mais sobre os métodos de observação dela.

Quatro métodos de observação comuns da iluminação transmitida

Agora que nós mostramos a maioria dos métodos de observação usados para luz transmitida, vamos explorar as suas características e aplicações comuns.

• Campo claro: a iluminação transmitida de campo claro é o método mais usado. A luz transmitida é aplicada diretamente abaixo do espécime. A luz passa pelo espécime e, com isso, o contraste é criado pela atenuação da luz transmitida através das áreas densas da amostra. Se a amostra não estiver tingida e não possuir cor inerente, somente pequenas quantidades de informação poderão ser obtidas. Neste caso, outros métodos de observação serão mais úteis.

• Campo escuro: a iluminação transmitida de campo escuro funciona bem para amostras não tingidas e transparentes. A luz central que geralmente passa pelo espécime é bloqueada e somente os raios oblíquos de todos os azimutes chegam ao espécime. Os raios oblíquos são difratados, refletidos e/ou refratados por descontinuidades ópticas. O resultado é um espécime claro em um fundo escuro.

• Contraste oblíquo: a iluminação transmitida oblíqua também funciona bem com amostras não tingidas e transparentes. Este método permite ajustar o ângulo da luz para ganhar algum contraste. Ele fornece um contraste maior em comparação com o campo claro, mas menor em comparação com o campo escuro. Com o método oblíquo, você pode alterar a aparência da amostra facilmente para encontrar o ângulo correta da iluminação.

• Iluminação polarizada: a iluminação transmitida polarizada pode ser usada em espécimes anisotrópicos, os quais geralmente possuem múltiplos índices de refração (espécimes birrefringentes). A polarização exige mais equipamentos, pois o espécime birrefringente deve ser colocado entre um polarizador e um analisador. O contraste é obtido a partir da interação da luz polarizada do plano com o espécime birrefringente, o que produzirá dois componentes de onda separados que são polarizados em planos mutuamente perpendiculares.